Биология ва тиббиёт муаммолари 2026, №5 (171)
Maqola mavzusi
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ МИКОБАКТЕРИАЛЬНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ И СТАНДАРТИЗИРОВАННЫЙ КОМПЛЕКСНЫЙ ПРОТОКОЛ МОРФОЛОГИЧЕСКОЙ, МОРФОМЕТРИЧЕСКОЙ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ТИМУСА И СЕЛЕЗЁНКИ (516-520)
Mualliflar
Тоиров Ойбек Алиевич
Muassasa
Бухарский государственный медицинский институт, Республика Узбекистан, г. Бухара
Annotatsiya
Цель: представить экспериментальную модель ми-кобактериального воздействия на основе полного адъюванта Фрейнда и стандартизированный ком-плексный протокол одновременной морфологиче-ской, гистохимической, морфометрической, имму-ногистохимической и гематологической оценки ти-муса и селезёнки у крыс с учётом возрастного фак-тора. Материал и методы: исследование выполнено на 80 белых беспородных крысах-самцах, распреде-лённых на четыре группы (интактные и опытные в возрасте 4 и 9 мес, по 20 животных); объём выбор-ки обоснован методом ресурсного уравнения и рас-чётом статистической мощности. Микобактери-альное воздействие моделировали однократным вве-дением полного адъюванта Фрейнда (M. tuberculosis H37Ra, 0,2 мл). Применяли окраску гематоксилином и эозином, по Ван Гизону, серебрение по Гомори, цифровую морфометрию в QuPath 0.5.1, иммуноги-стохимическую панель (CD3, CD20, CD68, Caspase-3, CD138), гематологический и иммунобиохимиче-ский анализ, параметрические и непараметрические методы статистики. Результаты: протокол фор-мирует единую систему количественных данных на клеточном (экспрессия иммуногистохимических маркёров), тканевом (морфометрия зон тимуса и селезёнки, доля коллагена и ретикулярных волокон) и системном (показатели крови) уровнях; «слепая» оценка кодированных препаратов и нормирование относительно интактных групп позволяют отно-сить различия к действию микобактериального фактора и возраста. Заключение: предложенные модель и протокол обеспечивают объективную, вос-производимую и статистически обоснованную оценку изменений тимуса и селезёнки и могут быть рекомендованы для экспериментально-морфологических исследований иммунных органов.
Kalit so'zlar
экспериментальная модель, адъювант Фрейнда, тимус, селезёнка, морфометрия, иммуногистохимия, QuPath, статистический анализ, обоснование объёма выборки.
Adabiyotlar
1. Матюшкин А.И., Иванова Е.А., Алексеева С.В., Качалов К.С., Воронина Т.А. Сравнение вы-раженности воспаления у крыс с первичной реак-цией и вторичной иммунологической реакцией на инъекцию полного адъюванта Фрейнда // Биоме-дицина. 2019;15(2):75–87. doi: 10.33647/2074-5982-15-2-75-87. 2. Axmedova Sh.M. Investigation of thymus changes after traumatic brain injury using immuno-histochemical markers (CD-68) // Doktor axbo-rotnomasi. 2024;4(116):10–13. 3. Bankhead P., Loughrey M.B., Fernández J.A., et al. QuPath: open source software for digital patholo-gy image analysis // Sci Rep. 2017;7(1):16878. doi: 10.1038/s41598-017-17204-5. PMID: 29203879. 4. Billiau A., Matthys P. Modes of action of Freund's adjuvants in experimental models of auto-immune diseases // J Leukoc Biol. 2001;70(6):849–860. doi: 10.1189/jlb.70.6.849. PMID: 11739546. 5. Charan J., Kantharia N.D. How to calculate sam-ple size in animal studies? // J Pharmacol Pharma-cother. 2013;4(4):303–306. doi: 10.4103/0976-500X.119726. PMID: 24250214. 6. Dzhalilova D.Sh., Kosyreva A.M., Diatroptov M.E., Zolotova N.A., Tsvetkov I.S., Mkhitarov V.A., et al. Morphological characteristics of the thymus and spleen and the subpopulation composition of lymphocytes in peripheral blood during systemic inflammatory response in male rats with different resistance to hypoxia // Int J Inflam. 2019;2019:7584685. doi: 10.1155/2019/7584685. 7. Festing M.F.W., Altman D.G. Guidelines for the design and statistical analysis of experiments using laboratory animals // ILAR J. 2002;43(4):244–258. doi: 10.1093/ilar.43.4.244. PMID: 12391400. 8. Ismail C.A.N., Noh A.S.M., Tan D.C., Khir N.A.M., Shafin N. A review on complete Freund's adjuvant-induced arthritic rat model: factors leading to its success // IIUM Med J Malays. 2022;21(4). doi: 10.31436/imjm.v21i4.2026. 9. Kilkenny C., Browne W.J., Cuthill I.C., et al. Improving bioscience research reporting: the AR-RIVE guidelines for reporting animal research // PLoS Biol. 2010;8(6):e1000412. doi: 10.1371/journal.pbio.1000412. PMID: 20613859. 10. Kodama R., Okazaki T., Sato T., et al. Age dif-ference in morphology and immunohistology in the thymus and spleen in rats // J Toxicol Pathol. 2012;25(1):55–61. doi: 10.1293/tox.25.55. PMID: 22481859. 11. Mehrvar S., Maisonave K., Buck W., Guffroy M., Bawa B., Himmel L. Immunohistochemistry-free enhanced histopathology of the rat spleen using deep learning // Toxicol Pathol. 2025. doi: 10.1177/01926233241303907. PMID: 39726256. 12. Noh A.S.M., Chuan T.D., Khir N.A.M., et al. Effects of different doses of complete Freund's adju-vant on nociceptive behaviour and inflammatory parameters in polyarthritic rat model mimicking rheumatoid arthritis // PLoS One. 2021;16(12):e0260423. doi: 10.1371/journal.pone.0260423. PMID: 34879087. 13. Percie du Sert N., Hurst V., Ahluwalia A., et al. The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research // PLoS Biol. 2020;18(7):e3000410. doi: 10.1371/journal.pbio.3000410. PMID: 32663219. 14. Turdiyev M.R., Teshayev Sh.J., Sokhibova Z.R. Morphofunctional features of the thymus of white rats depending on age periods in alimentary seleni-um deficiency // Am J Med Med Sci. 2026;16(1):50–53. doi: 10.5923/j.ajmms.20261601.13.